| Material de muestra | 10 ml de bufanda humana |
| Método de aislamiento | No magnético con 280µl CD14 S-pluriBead® anti-humano o 300µl M-pluriBead® anti-humano |
| Rendimiento | ~6 * 10^6 S-pluriBead® o ~12 * 10^6 M-pluriBead® |
| Vitalidad | >92% (Tinción de azul de tripán) |
| Pureza | ~97% |
Lavar el material de la muestra dos veces con el tampón de lavado suministrado (PBS + 0,05 % BSA y 2 mM EDTA, pH 7,4) para reducir el CD14 soluble. Añadir pluriBead CD14 para el aislamiento de los monocitos en el tubo de muestra e incubar en un pluriPlix o en un mezclador de rodillos de limpieza durante 20 minutos.
Después del aislamiento, resuspender las células en 1ml de RPMI 1640-medio (+10 % FCS y 1x Pen/Strep) y determinar el número de células. Para el cultivo de monocitos en una placa de cultivo celular de 24 pozos, se utiliza 1 millón de células por pozo y se incuban con 1ml de monocitos-cultivo-medio (RPMI 1640 + 10% FCS, 1x Pen/Strep, 2000 U/ml GM-CSF y 200 U/ml IL-4) a 37 °C y 5% de dióxido de carbono.
Después de 24h, quita el medio y añade 1ml de monocitos frescos-cultivo-medio. Entonces, las células se cultivan durante 4 días más. Después de un total de 5 días, se estimulan las células con 100ng/ml de LPS durante otras 24h. Las células activadas se eliminan con tripsina y la tasa de maduración a células dentríticas de los monocitos se detecta por análisis fluorescente de CD1a, CD14 y CD83.
Análisis fluorescente de las células dentríticas maduras CD11a+, CD14+, CD83+
Células CD14+ después del aislamiento en el cultivo, maduración de los monocitos a células dendríticas después de 5 días de cultivo con GM-CSIF/IL-4 y estimulación con LPS
La Compañía de Separación de Células 
