PBMC

Cella Mononucleare Sangue Periferico

Una cellula mononucleare del sangue periferico (PBMC) è una cellula del sangue con un singolo nucleo rotondo. Le PBMC che sono talvolta denominate PMNC (cellula mononucleare periferica) o MNC (cellula mononucleare) comprendono tutti i leucociti mononucleati come i linfociti (cellule T, cellule B, cellule NK), monociti, cellule dendritiche e basofili.

Il termine PBMC è fortemente associato all'arricchimento delle cellule del sangue intero attraverso una centrifugazione a gradiente di densità. Leucociti polimorfonucleari (nuclei multilobo) come i granulociti sono impoveriti in quella frazione. I granulociti (neutrofili ed eosinofili) possono essere arricchiti da una frazione PBMC fatta da una separazione a gradiente di densità standard*. I basofili si differenziano per la loro densità e in parte si trovano nella frazione PBMC. I globuli rossi sono ridotti al minimo rispetto alla conta delle cellule di partenza.

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* Medio con una densità di 1,077 g/ml

Arricchimento di PBMC tramite centrifugazione di densità

Gradiente di densità arricchito PBMC sono a volte chiamati buffy coat. In questo contesto, buffy coat descrive lo strato di leucociti arricchiti nell'interfase.

In primo luogo, una soluzione di polimeri sintetici con una densità definita viene sovrapposta al sangue o al materiale campione. Questa preparazione del campione è seguita da una fase di centrifugazione. All'interfase di entrambe le soluzioni, le cellule si accumulano con la corrispondente densità della soluzione di polimero. Poi l'interfase, che contiene il PBMC, viene accuratamente rimosso. Le celle mononucleari arricchite vengono lavate e utilizzate per un'ulteriore applicazione.