密度梯度离心

富集细胞和优化细胞分离方法对许多研究人员来说至关重要。有多种方法可用于分拣不同类型的细胞,而选择合适的方法往往取决于细胞类型或细胞亚群。密度梯度离心法是分离细胞更快、更经济的方法之一。根据各血液成分的不同密度,可使用适当的密度梯度培养基进行一步法离心分离。这种技术的原理是,在离心过程中,不同密度的颗粒有不同的沉降速度。红细胞等重颗粒沉降速度快,而血小板等轻细胞沉降速度较慢。下图显示了血液中最重要的细胞群的分布情况。红细胞的密度最高,血小板的密度最低。 

血液主要由以下细胞群组成:血栓细胞(1)、单核细胞(2)、淋巴细胞(3)、嗜碱性粒细胞(4)、中性粒细胞(5)、嗜酸性粒细胞(6)和红细胞(7)。嗜酸性粒细胞(5)、嗜酸性粒细胞(6)和红细胞(7)。嗜酸性粒细胞(6)和红细胞(7)在粒度和粒径上各不相同。

图血液主要由以下细胞群组成:血小板 (1)、单核细胞 (2)、淋巴细胞 (3)、嗜碱性粒细胞 (4)、中性粒细胞 (5)、嗜酸性粒细胞 (6) 和红细胞 (7)。这些细胞群的密度和细胞数量各不相同。不同密度的细胞群可使用密度培养基进行富集。

表:血细胞密度范围

类型

血细胞

密度(克/毫升)

1

血小板

1,050 - 1,070

2

单核细胞

1,060 - 1,068

3

淋巴细胞

1,067 - 1,077

4

嗜碱性粒细胞

1,072 - 1,081

5

中性粒细胞

1,079 - 1,098

6

嗜酸性粒细胞

1,089 - 1,095

7

红细胞

1,090 - > 1,100

从图中可以看出,细胞或细胞群的密度是围绕平均值的分布。此外,不同细胞群的密度是重叠的。平均值周围的范围和分布都不是固定值。密度的波动会受到各种因素的影响。影响细胞密度的最重要因素之一是水合作用。     

相应的密度介质有一个确定的截止点。密度低于截止值的所有细胞在分离介质上聚集成一层。密度高于截止值的细胞则穿过分离介质,聚集在试管底部。