PBMC - 末梢血単核細胞

PBMC - 末梢血単核細胞

末梢血単核球（PBMC）とは、単一の丸い核を持つ血液細胞である。末梢」とは、骨髄などの造血器官には存在せず、末梢血中を循環している成熟した血液細胞を指す。 

注：末梢血とは、骨髄で形成された後に血管に入り、そこを循環する血液のことである。我々の記事：「細胞分離の出発材料としての全血」。には、血液に関するさらに興味深い情報が掲載されている。 

末梢血の主な成分には、輸送媒体となる血漿、赤血球 血液細胞（赤血球）, 白血球 と血小板（血小板細胞）である。

PMNC（末梢単核球）またはMNC（単核球）と呼ばれることもあるPBMCは、すべての単核白血球からなる。これらには以下が含まれる：

- リンパ球（T細胞、B細胞、NK細胞）

- モノジテン

- 樹状細胞と 

- 好塩基性顆粒球。

密度勾配遠心分離によるPBMCの濃縮

PBMC（末梢血単核球）という言葉は、以下の細胞の集積と密接に関係している。 全血 を使用している。 密度勾配遠心分離血液成分は密度が異なるため、分離が可能である。これは、適切な密度勾配培地を用いた一段階遠心分離によって行われる。単核球のカットオフは1.077g/mlである。

密度勾配で濃縮されたPBMCはバフィーコートと呼ばれることもある。この文脈では、バフィーコートは間相に濃縮された白血球の層を表す。この特殊なケースであるPBMCの場合、バフィーコートは単核球のみからなり、この意味で特別なバフィーコートである。

顆粒球のような多形核白血球（複数の分節した核を持つ）は、PBMCでは枯渇している。したがって、好中球および好酸球顆粒球は、標準的な密度勾配分離（培地の密度は1.077g/ml）で調製したPBMC画分から濃縮することはできない。好塩基性顆粒球は密度が異なり、PBMC分画に部分的に認められる。赤血球は最初の細胞数と比較して強く減少している。

密度勾配培地を用いたPBMC濃縮の一般的プロセス

まず、決められた濃度の合成ポリマー溶液を血液またはサンプル物質と重ねる。調製後、遠心分離を行う。細胞は2つの溶液の間相に、対応する密度で蓄積する。PBMCを含む間相は注意深く除去される。濃縮された単核球は洗浄され、さらなる用途に使用される。

PBMCスピン培地によるPBMCの単離または濃縮

ダス 全血 (1)をまず慎重に適用する。 PBMCスピン培地 (2)を遠沈管に入れる。2つの液体が混ざらないように注意すること。プルリメートチューブを使用することもできる。pluriMateバリアーを使用することで、重層が容易になり、サンプル材料が密度勾配メデュームと混合するのを防ぐことができる。  

 次の遠心分離ステップでは、実際の 密度勾配遠心分離サンプルは異なる層に分離されます。単核細胞(2)は血漿(1)と密度培地(3)の間に濃縮される。