Fuldblod som udgangsmateriale til celleseparation

Blod består af ca. 55-60 % plasma og 40-45 % cellulære komponenter. Plasmaet består hovedsageligt af vand (ca. 90 %), proteiner (såsom albumin, koagulationsfaktorer og immunoglobuliner) samt elektrolytter, næringsstoffer og affaldsstoffer fra stofskiftet. De cellulære komponenter omfatter Erytrocytter (røde blodlegemer), Leukocytter (hvide blodlegemer) Und Trombocytter (blodplader).

Blodet transporterer ilt og kuldioxid, næringsstoffer, affaldsstoffer, varme og forskellige aktive stoffer (f.eks. kroppens egne cytokiner og indtagne lægemidler) gennem kroppen via et omfattende netværk af arterielle og venøse kar.

Dannelsen af blodceller (hæmatopoiese) sker i knoglemarven fra multipotente hæmatopoietiske stamceller (HSC). Disse differentieres til forskellige forstadieceller, som modnes til de tre hovedgrupper: erythropoiesis (dannelse af Erytrocytter), leukopoiesis (dannelse af Leukozyten) og trombopoiesis (dannelse af Trombocytter).

Isolering af celler eller cellekomponenter fra fuldblod er et vigtigt skridt inden for forskning og diagnostik. For specifikt at kunne undersøge visse cellers funktion eller udføre molekylære analyser skal disse celletyper først være rene og adskilte. På den måde kan man undgå interferens fra andre blodkomponenter, eksperimenterne bliver mere reproducerbare og resultaterne mere meningsfulde. Samtidig er isolering afgørende for terapeutiske anvendelser, f.eks. inden for celleterapi eller immunmodulation, hvor der kræves meget rene cellepopulationer. Vores artikel "Celleseparation og celleseparationsmetoder" opsummerer tydeligt de vigtigste teknikker til isolering af celler og cellepopulationer. En kritisk faktor i isoleringen af celler fra blod er den effektive hæmning af koagulation.

For at kunne identificere specifikke celler eller cellepopulationer, som f.eks PBMC.For at kunne isolere blod direkte fra fuldblod er det vigtigt at blande blodprøven med antikoagulanter. Uden antikoagulanter (især plasmatiske antikoagulanter) ville blodet størkne, og en ren adskillelse af cellekomponenterne ville ikke være mulig. Afhængigt af analysen bruges der forskellige antikoagulanter til at bestemme blodets cellemorfologi, koagulerbarhed eller kemiske sammensætning.

Antikoagulation beskriver hæmning af blodets koagulation gennem indgivelse eller tilsætning af antikoagulerende stoffer. I forbindelse med tapning af fuldblod betyder det, at blodet stabiliseres under eller umiddelbart efter tapningen ved at blande det med antikoagulerende stoffer. Det forhindrer koagulation og stabiliserer blodet til videre behandling. De vigtigste antikoagulanter kan kategoriseres i tre hovedgrupper:

1. plasma-antikoagulanter til blodprøver og transfusioner

2. direkte og indirekte hæmmere af blodkoagulation (systemiske antikoagulantia)

3. hæmmere af blodpladeaggregering (indirekte antikoagulantia)

Systemiske antikoagulantia og blodpladeaggregationshæmmere bruges som lægemidler, virker i kroppen (in vivo) og er ikke egnede til celleseparation.  

Plasmatiske antikoagulantia bruges hovedsageligt til blodtapning og blodkonservering. De forhindrer blodets koagulation uden for kroppen (in vitro) ved at binde eller inaktivere koagulationsfaktorer eller calcium (som er afgørende for blodets koagulation).

De vigtigste plasmatiske antikoagulanter er EDTA (ethylen-diamin-tetraeddikesyre), citrat (f.eks. natriumcitrat) og heparin.

Blod er et uundværligt forskningsmedie, da det indeholder mange cellulære og opløselige komponenter, der giver indsigt i fysiologiske processer, sygdomsmekanismer og terapeutiske tilgange. Men omhyggelig prøveforberedelse og brug af professionelle produkter til celleberigelse er afgørende for at opnå meningsfulde resultater og dermed optimere brugen af blod til forskning og diagnostik.