Blut, das ungefiltert aus der Vene eines Spenders in einem dafür vorgesehenen Gefäß aufgefangen wird, bezeichnet man als Vollblut. Vollblut umfasst somit sämtliche physiologisch vorkommenden Blutbestandteile, wie Zellen, Proteine und alle lösliche Komponenten. Je nach Körpergröße beträgt das Blutvolumen eines erwachsenen Menschen etwa 4–6 Liter.
Hauptbestandteile von Vollblut
La sangre se compone de aproximadamente un 55-60 % pelasma y un 40-45 % ccomponentes celulares. El plasma se compone principalmente de agua (aprox. 90 %), proteínas (como albúmina, factores de coagulación e inmunoglobulinas), así como electrolitos, nutrientes y productos de desecho metabólicos. Los componentes celulares incluyen eritrocitos (glóbulos rojos), leucocitos (glóbulos blancos) y trombocitos (plaquetas).
La sangre transporta oxígeno y dióxido de carbono, nutrientes, productos de desecho, calor y diversas sustancias activas (por ejemplo, las propias citocinas del cuerpo y los productos farmacéuticos ingeridos) a través del cuerpo mediante una extensa red de vasos arteriales y venosos.
La formación de células sanguíneas (hematopoyesis) tiene lugar en la médula ósea a partir de células madre hematopoyéticas multipotentes (CMH). Estas se diferencian en diversas células precursoras, que maduran en tres grupos principales: eritropoyesis (formación de eritrocitos), leucopoyesis (formación de leucocitos) y trombopoyesis (formación de trombocitos).
Separación de sangre completa y células
Die Isolation von Zellen oder Zellbestandteilen aus Vollblut ist ein zentraler Schritt in der Forschung und Diagnostik. Um gezielt die Funktion bestimmter Zellen zu untersuchen oder molekulare Analysen durchzuführen, müssen diese Zelltypen zunächst rein und getrennt vorliegen. So lassen sich Störeinflüsse durch andere Blutbestandteile vermeiden, Experimente werden reproduzierbarer und Ergebnisse aussagekräftiger. Gleichzeitig ist die Isolation entscheidend für therapeutische Anwendungen, etwa in der Zelltherapie oder bei Immunmodulation, wo hochreine Zellpopulationen benötigt werden.
Sangre completa y anticoagulación
Para identificar células o poblaciones celulares específicas, como PBMC.Para aislar la sangre directamente de la sangre completa, es esencial mezclar la muestra con anticoagulantes. Sin anticoagulantes (especialmente los plasmáticos), la sangre se coagularía y no sería posible separar los componentes celulares de forma precisa. Según el análisis, se utilizan diferentes anticoagulantes para preservar la morfología celular, la coagulabilidad o la composición química de la sangre.
La anticoagulación describe la inhibición de la coagulación sanguínea mediante la administración o adición de sustancias anticoagulantes. En relación con la extracción de sangre completa, esto significa que la sangre se estabiliza durante o inmediatamente después de la extracción mezclándola con anticoagulantes. Esto previene la coagulación y la estabiliza para su posterior procesamiento. Los anticoagulantes más importantes se pueden dividir en tres grupos principales:
1. anticoagulantes plasmáticos para muestras de sangre y transfusiones
2. inhibidores directos e indirectos de la coagulación sanguínea (anticoagulantes sistémicos)
3. inhibidores de la agregación plaquetaria (anticoagulantes indirectos)
Systemische Antikoagulantien als auch Thrombozytenaggregationshemmer werden als Medikamente eingesetzt, wirken im Körper (in vivo), und sind für die Zellseparation nicht geeignet.
Anticoagulantes de sangre completa y plasma
Los anticoagulantes plasmáticos se utilizan principalmente para la toma de muestras de sangre y su conservación. Previenen la coagulación sanguínea fuera del organismo (in vitro) mediante la unión o inactivación de factores de coagulación o calcio (esenciales para la coagulación sanguínea).
Die wichtigsten plasmatischen Antikoagulantien sind EDTA (Ethylen-Diamin-Tetraessigsäure) Citrat (z. B. Natriumcitrat) und Heparin.
EDTA Lösung, 0.2 M in PBS
Sterile Lösung (Chelatbildner) zur Verhinderung der Aggregation von Thrombozyten
Fazit
Blut ist ein unverzichtbares Forschungsmedium, da es zahlreiche zelluläre und lösliche Bestandteile enthält, die Einblicke in physiologische Prozesse, Krankheitsmechanismen und therapeutische Ansätze ermöglichen. Entscheidend für aussagekräftige Ergebnisse sind jedoch eine sorgfältige Probenvorbereitung und der Einsatz professioneller Produkte zur Zellanreicherung, um Blut optimal für Forschung und Diagnostik nutzbar zu machen.