L'enrichissement des cellules et l'optimisation des méthodes de séparation cellulaire jouent un rôle crucial pour de nombreux chercheurs. Il existe plusieurs approches pour trier différents types de cellules, et le choix de la méthode appropriée dépend souvent du type de cellule ou du sous-ensemble de cellules. La centrifugation en gradient de densité est l'une des méthodes les plus rapides et les plus rentables pour séparer les cellules. En fonction des différentes densités des composants sanguins individuels, ceux-ci peuvent être séparés par centrifugation en une seule étape avec le milieu de gradient de densité approprié. La technique repose sur le fait que, pendant la centrifugation, les particules de différentes densités ont des vitesses de sédimentation différentes. Les particules lourdes telles que les érythrocytes sédimentent rapidement, tandis que les cellules plus légères telles que les thrombocytes sédimentent plus lentement. La figure suivante montre la répartition des principales populations cellulaires dans le sang. Les érythrocytes ont la densité la plus élevée et les plaquettes la densité la plus faible.
Figure : Le sang se compose principalement des populations cellulaires suivantes : Thrombocytes (1), monocytes (2), lymphocytes (3), granulocytes basophiles (4), granulocytes neutrophiles (5), granulocytes éosinophiles (6) et érythrocytes (7). Les populations cellulaires diffèrent en densité et en nombre de cellules. Les différentes densités des populations cellulaires peuvent être utilisées pour l'enrichissement en utilisant des milieux denses.
Tableau : Plages de densité des cellules sanguines
Type | Cellule sanguine | Densité (g/ml) |
1 | Thrombocytes | 1,050 - 1,070 |
2 | Monocytes | 1,060 - 1,068 |
3 | Lymphocytes | 1,067 - 1,077 |
4 | Granulocytes basophiles | 1,072 - 1,081 |
5 | Neutrophile granulocyte | 1,079 - 1,098 |
6 | Granulocytes éosinophiles | 1,089 - 1,095 |
7 | Erythrocytes | 1 090 - > ; 1 100 |
Comme le montre la figure, la densité des cellules ou des populations de cellules est une distribution autour d'une valeur moyenne. En outre, les densités des différentes populations de cellules se chevauchent. L'étendue et la distribution autour de la valeur moyenne ne sont pas des valeurs fixes. Les fluctuations de la densité peuvent être influencées par différents facteurs. L'un des principaux facteurs influençant la densité des cellules est l'hydratation.
Le milieu de densité respectif a un seuil défini. Toutes les cellules dont la densité est inférieure au seuil s'accumulent en couche sur le milieu de séparation. Les cellules dont la densité est supérieure au seuil passent à travers le milieu de séparation et s'accumulent au fond du tube.