I leucociti, comunemente chiamati globuli bianchi, fanno parte del sistema immunitario e proteggono l'organismo dalle infezioni e dalle sostanze estranee. I concentrati di leucociti sono disponibili direttamente dal donatore di sangue. Per quantità minori, è possibile separare i leucociti o le PBMC (cellule mononucleate del sangue periferico) mediante centrifugazione a densità. Un buffy coat da una donazione di sangue è interessante per l'isolamento cellulare diretto con pluriBead, in quanto i globuli bianchi sono altamente concentrati e la densità cellulare è quindi molto alta.
Il buffy coat descrive un sottile strato giallo-bianco scintillante tra gli eritrociti e il plasma sanguigno, che si crea durante la centrifugazione di un campione di sangue intero.
Cappotto Buffy di Blutspende
Il "buffy coat", noto anche come concentrato di leucociti, è un sottoprodotto della produzione di concentrati di globuli rossi e piastrine da una donazione di sangue intero. La compatibilità e la durata di conservazione degli emoderivati sono aumentate grazie alla rimozione dei leucociti, che fanno parte del sistema immunitario umano. I rischi e gli effetti collaterali, come la febbre o la formazione di anticorpi che si verificano durante la somministrazione di trasfusioni, possono essere ridotti al minimo rimuovendo i globuli bianchi. Una sacca di sangue destinata a scopi medici e infusioni non deve contenere più di un milione di leucociti. Da questo punto di vista, un buffy coat contenente 10-20 volte la concentrazione di leucociti viene prodotto come prodotto di scarto.
Fatti sul cappotto Buffy
- Ideale per l'isolamento di cellule, test immunologici o virologici.
- Sottoprodotto della lavorazione di Purosangue.
- La riduzione dei leucociti aiuta a evitare complicazioni durante le trasfusioni di sangue.
- Vengono prodotti fisicamente, senza l'uso di soluzioni polimeriche.
- I leucociti sono concentrati da 10 a 20 volte in più rispetto a quelli presenti nella Purosangue.
Come estrarre Buffy Coat da Purosangue
Per la produzione di buffy coat sono adatti due metodi. In primo luogo, la donazione di sangue intero viene centrifugata per rimuovere il Purosangue in eritrociti, plasma e buffy coat. La seconda opzione consiste nel filtrare il sangue e conservare i leucociti.
Preparare una frazione di buffy coat nel suo laboratorio fresco Purosangue
Un'altra opzione è quella di realizzare da sé il buffy coat. Basta seguire il protocollo breve:
- Mescolare una parte Purosangue con una parte di tampone di lavaggio
- Centrifugare la soluzione diluita Purosangue per 10 minuti a 200 x g con il freno disattivato
- Rimuovere i leucociti - interfase (buffy coat)
Buffy Coat per la separazione specifica delle cellule con pluriBead
- Alto numero di cellule in un tempo molto breve
- Nessuna preparazione del campione
- Ideale per la separazione di tipi di cellule rare
- Il semplice recupero del materiale del campione dopo l'isolamento consente il successivo isolamento di ulteriori cellule target