PBMC - 外周血单核细胞

PBMC - 外周血单核细胞

外周血单核细胞（PBMC）是一种具有单个圆形细胞核的血细胞。外周 "一词指的是不位于骨髓等造血器官，而是在外周血中循环的成熟血细胞。 

注：外周血是指在骨髓中形成后进入血管并在血管中循环的血液。我们的文章："作为细胞分离起始材料的全血"。一文中包含更多有关血液的有趣信息。 

除了作为运输介质的血浆外，外周血的主要成分还包括红细胞。 血细胞（红细胞）, 白细胞 ) 和 血小板(血栓滕)。

PBMC 有时也称为 PMNC（外周单核细胞）或 MNC（单核细胞），由所有单核白细胞组成。这些细胞包括

- 淋巴细胞（T 细胞、B 细胞、NK 细胞）

- 单核细胞

- 树突状细胞和 

- 嗜碱性粒细胞

用密度梯度离心法分离/富集白细胞母细胞

PBMC（外周血单核细胞）一词与从以下细胞中分离细胞密切相关 全血 通过 密度梯度离心由于血液成分的密度不同，因此可以将其分离；分离方法是在适当的密度梯度培养基中进行一步离心。单核细胞的临界值为 1.077 g/ml。

密度梯度富集的PBMC有时被称为血细胞层。在此情况下，血细胞层是指间期富集的白细胞层。在这个特殊情况下，血细胞层仅由单核细胞组成，因此是一种特殊的血细胞层。

粒细胞等多形核白细胞（具有多个分节核）在此部分中被耗尽。中性粒细胞和嗜酸性粒细胞无法从标准密度梯度分离法制备的 PBMC 部分中富集（培养基密度为 1.077 g/ml）。嗜碱性粒细胞的密度不同，可在 PBMC 部分中发现部分嗜碱性粒细胞。与初始细胞数相比，红细胞明显减少。

首先，在血液或样本材料上覆盖一定密度的合成聚合物溶液。制备完成后，进行离心步骤。在两种溶液的中间相中，细胞以相应的密度聚集。含有 PBMC 的间相会被小心移除。然后对富集的单核细胞进行洗涤并用于进一步的应用。

使用密度梯度培养基富集 PBMC 的一般过程

首先，在血液或样本材料上覆盖一定密度的合成聚合物溶液。制备完成后，进行离心步骤。细胞以相应的密度聚集在两种溶液的相间层中。含有 PBMC 的相间层被小心移除。然后对富集的单核细胞进行洗涤并用于进一步的应用。

用 PBMC 旋转培养基分离/富集 PBMC

这个 全血 小心翼翼地叠加到 PBMC 旋转培养基 (2) ，将其放入离心管中。必须注意确保两种液体不会混合。也可以使用 pluriMate 管。pluriMate 隔离层便于分层，防止样品材料与密度介质混合。  

在接下来的离心步骤中，实际的 密度梯度离心将样本分离到不同的层中。单核细胞（2）在血浆（1）和密度介质（3）之间富集。