Blut, das ungefiltert aus der Vene eines Spenders in einem dafür vorgesehenen Gefäß aufgefangen wird, bezeichnet man als Vollblut. Vollblut umfasst somit sämtliche physiologisch vorkommenden Blutbestandteile, wie Zellen, Proteine und alle lösliche Komponenten. Je nach Körpergröße beträgt das Blutvolumen eines erwachsenen Menschen etwa 4–6 Liter.
Hauptbestandteile von Vollblut
Il sangue è composto da circa 55-60 % plasma e 40-45 % ccomponenti ellulari. Il plasma è costituito principalmente da acqua (circa il 90%), proteine (come l'albumina, i fattori di coagulazione e le immunoglobuline), nonché elettroliti, nutrienti e prodotti finali del metabolismo. I componenti cellulari comprendono eritrociti (globuli rossi), leucociti (globuli bianchi) e trombociti (piastrine).
Il sangue trasporta l'ossigeno e l'anidride carbonica, i nutrienti, i prodotti di scarto, il calore e varie sostanze attive (ad esempio le citochine dell'organismo e i farmaci ingeriti) attraverso il corpo, grazie a un'ampia rete di vasi arteriosi e venosi.
La formazione delle cellule del sangue (ematopoiesi) avviene nel midollo osseo a partire da cellule staminali ematopoietiche multipotenti (HSC). Queste si differenziano in vari precursori, che maturano nei tre gruppi principali: eritropoiesi (formazione di eritrociti), leucopoiesi (formazione di leucociti) e trombopoiesi (formazione di trombociti).
Separazione di sangue intero e cellule
Die Isolation von Zellen oder Zellbestandteilen aus Vollblut ist ein zentraler Schritt in der Forschung und Diagnostik. Um gezielt die Funktion bestimmter Zellen zu untersuchen oder molekulare Analysen durchzuführen, müssen diese Zelltypen zunächst rein und getrennt vorliegen. So lassen sich Störeinflüsse durch andere Blutbestandteile vermeiden, Experimente werden reproduzierbarer und Ergebnisse aussagekräftiger. Gleichzeitig ist die Isolation entscheidend für therapeutische Anwendungen, etwa in der Zelltherapie oder bei Immunmodulation, wo hochreine Zellpopulationen benötigt werden.
Sangue intero e anticoagulazione
Per identificare cellule o popolazioni cellulari specifiche, come ad esempio PBMC.Per isolare il sangue direttamente dal sangue intero, è essenziale mescolare il campione di sangue con anticoagulanti. Senza anticoagulanti (soprattutto anticoagulanti plasmatici), il sangue si coagulerebbe e non sarebbe possibile una separazione pulita dei componenti cellulari. A seconda dell'analisi, si utilizzano diversi anticoagulanti per ottenere la morfologia cellulare, la coagulabilità o la composizione chimica del sangue.
L'anticoagulazione descrive l'inibizione della coagulazione del sangue attraverso la somministrazione o l'aggiunta di sostanze anticoagulanti. In relazione al prelievo di sangue intero, ciò significa che il sangue viene stabilizzato durante o subito dopo il prelievo, mescolandolo con sostanze anticoagulanti. Ciò impedisce la coagulazione e stabilizza il sangue per la successiva lavorazione. Gli anticoagulanti più importanti possono essere suddivisi in tre gruppi principali:
1. anticoagulanti del plasma per i campioni di sangue e le trasfusioni
2. inibitori diretti e indiretti della coagulazione del sangue (anticoagulanti sistemici)
3. inibitori dell'aggregazione piastrinica (anticoagulanti indiretti)
Systemische Antikoagulantien als auch Thrombozytenaggregationshemmer werden als Medikamente eingesetzt, wirken im Körper (in vivo), und sind für die Zellseparation nicht geeignet.
Anticoagulanti per sangue intero e plasma
Gli anticoagulanti plasmatici sono utilizzati principalmente per il prelievo e la conservazione del sangue. Impediscono la coagulazione del sangue all'esterno del corpo (in vitro) legando o inattivando i fattori di coagulazione o il calcio (che è essenziale per la coagulazione del sangue).
Die wichtigsten plasmatischen Antikoagulantien sind EDTA (Ethylen-Diamin-Tetraessigsäure) Citrat (z. B. Natriumcitrat) und Heparin.
EDTA Lösung, 0.2 M in PBS
Sterile Lösung (Chelatbildner) zur Verhinderung der Aggregation von Thrombozyten
Fazit
Blut ist ein unverzichtbares Forschungsmedium, da es zahlreiche zelluläre und lösliche Bestandteile enthält, die Einblicke in physiologische Prozesse, Krankheitsmechanismen und therapeutische Ansätze ermöglichen. Entscheidend für aussagekräftige Ergebnisse sind jedoch eine sorgfältige Probenvorbereitung und der Einsatz professioneller Produkte zur Zellanreicherung, um Blut optimal für Forschung und Diagnostik nutzbar zu machen.