On appelle sang total le sang qui est recueilli sans être filtré de la veine d'un donneur dans un récipient prévu à cet effet. Le sang total comprend donc tous les composants sanguins physiologiquement présents, tels que les cellules, les protéines et tous les composants solubles. Selon la taille du corps, le volume de sang d'un adulte est d'environ 4 à 6 litres.
Principaux composants du sang total
Le sang est composé d'environ 55 à 60 % de plasma sanguin et de 40 à 45 % de composants cellulaires. Le plasma est principalement composé d'eau (environ 90 %), de protéines (comme l'albumine, les facteurs de coagulation et les immunoglobulines) ainsi que d'électrolytes, de nutriments et de déchets du métabolisme. Les composants cellulaires comprennent Érythrocytes (globules rouges), Leucocytes (globules blancs) und Thrombocytes (plaquettes sanguines).
Le sang transporte l'oxygène et le dioxyde de carbone, les nutriments, les déchets, la chaleur et diverses substances actives (par exemple, les cytokines propres à l'organisme et les produits pharmaceutiques ingérés) à travers l'organisme grâce à un vaste réseau de vaisseaux artériels et veineux.
La formation des cellules sanguines (hématopoïèse) a lieu dans la moelle osseuse à partir de cellules souches hématopoïétiques multipotentes (CSH). Celles-ci se différencient en différents précurseurs qui mûrissent pour former les trois groupes principaux : l'érythropoïèse (formation des Érythrocytes), la leucopénie (formation de la Leukozyten) et la thrombopoïèse (formation des Plaquettes).
Séparation du sang total et des cellules
L'isolement de cellules ou de composants cellulaires à partir de sang total est une étape centrale dans la recherche et le diagnostic. Pour étudier de manière ciblée la fonction de certaines cellules ou effectuer des analyses moléculaires, ces types de cellules doivent d'abord être purs et séparés. Cela permet d'éviter les interférences avec d'autres composants sanguins, de rendre les expériences plus reproductibles et les résultats plus pertinents. En même temps, l'isolement est décisif pour les applications thérapeutiques, par exemple dans la thérapie cellulaire ou l'immunomodulation, où des populations de cellules très pures sont nécessaires. Notre article "Séparation cellulaire et méthodes de séparation cellulaire" résume clairement les principales techniques d'isolement de cellules et de populations cellulaires Un facteur critique dans l'isolement de cellules à partir du sang est l'inhibition efficace de la coagulation.
Sang total et anticoagulation
Afin d'identifier des cellules ou des populations cellulaires spécifiques, telles que PBMC.Pour pouvoir isoler le sang directement à partir du sang total, il est essentiel de mélanger l'échantillon de sang avec des anticoagulants. Sans anticoagulants (en particulier les anticoagulants plasmatiques), le sang coagulerait et il ne serait pas possible de séparer proprement les composants cellulaires. En fonction de l'analyse, différents anticoagulants sont utilisés pour préserver la morphologie cellulaire, la coagulabilité ou la composition chimique du sang.
L'anticoagulation désigne l'inhibition de la coagulation sanguine par l'administration ou l'ajout de substances anticoagulantes. Dans le cadre de la collecte de sang total, cela signifie que le sang est stabilisé pendant ou immédiatement après la collecte en le mélangeant avec des anticoagulants. Cela empêche la coagulation et rend le sang stable pour la suite du traitement. Les principaux anticoagulants peuvent être divisés en trois groupes principaux :
1. les anticoagulants plasmatiques pour les prélèvements et les transfusions sanguines
2. inhibiteurs directs et indirects de la coagulation sanguine (anticoagulants systémiques)
3. les inhibiteurs de l'agrégation plaquettaire (anticoagulants indirects)
Les anticoagulants systémiques ainsi que les antiplaquettaires sont utilisés comme médicaments, agissent dans le corps (in vivo), et ne sont pas adaptés à la séparation des cellules.
Anticoagulants pour le sang total et le plasma
Les anticoagulants plasmatiques sont principalement utilisés pour les prélèvements et la conservation du sang. Ils empêchent la coagulation du sang en dehors de l'organisme (in vitro) en liant ou en inactivant les facteurs de coagulation ou le calcium (essentiel à la coagulation du sang).
Les principaux anticoagulants plasmatiques sont l'EDTA (acide éthylène-diamine-tétra-acétique), le citrate (par ex. citrate de sodium) et l'héparine.
Solution EDTA, 0,2 M en PBS
Solution stérile (chélateur) pour empêcher l'agrégation des thrombocytes
Conclusion
Le sang est un milieu de recherche indispensable, car il contient de nombreux composants cellulaires et solubles qui permettent de comprendre les processus physiologiques, les mécanismes des maladies et les approches thérapeutiques. Une préparation minutieuse des échantillons et l'utilisation de produits professionnels pour l'enrichissement cellulaire sont toutefois décisives pour obtenir des résultats probants, afin de rendre le sang parfaitement utilisable pour la recherche et le diagnostic.