Blut, das ungefiltert aus der Vene eines Spenders in einem dafür vorgesehenen Gefäß aufgefangen wird, bezeichnet man als Vollblut. Vollblut umfasst somit sämtliche physiologisch vorkommenden Blutbestandteile, wie Zellen, Proteine und alle lösliche Komponenten. Je nach Körpergröße beträgt das Blutvolumen eines erwachsenen Menschen etwa 4–6 Liter.
Hauptbestandteile von Vollblut
Le sang est composé d'environ 55-60 % plasma et 40-45 % cellular. Le plasma est principalement composé d'eau (environ 90 %), de protéines (telles que l'albumine, les facteurs de coagulation et les immunoglobulines) ainsi que d'électrolytes, de nutriments et de déchets métaboliques. Les composants cellulaires comprennent les érythrocytes (globules rouges), les leucocytes (globules blancs) et les thrombocytes (plaquettes).
Le sang transporte l'oxygène et le dioxyde de carbone, les nutriments, les déchets, la chaleur et diverses substances actives (par exemple, les cytokines propres à l'organisme et les produits pharmaceutiques ingérés) à travers l'organisme grâce à un vaste réseau de vaisseaux artériels et veineux.
La formation des cellules sanguines (hématopoïèse) a lieu dans la moelle osseuse à partir de cellules souches hématopoïétiques multipotentes (CSH). Celles-ci se différencient en diverses cellules précurseurs, qui parviennent à maturité dans les trois groupes principaux : l'érythropoïèse (formation des érythrocytes), la leucopoïèse (formation des leucocytes) et la thrombopoïèse (formation des thrombocytes).
Séparation du sang total et des cellules
Die Isolation von Zellen oder Zellbestandteilen aus Vollblut ist ein zentraler Schritt in der Forschung und Diagnostik. Um gezielt die Funktion bestimmter Zellen zu untersuchen oder molekulare Analysen durchzuführen, müssen diese Zelltypen zunächst rein und getrennt vorliegen. So lassen sich Störeinflüsse durch andere Blutbestandteile vermeiden, Experimente werden reproduzierbarer und Ergebnisse aussagekräftiger. Gleichzeitig ist die Isolation entscheidend für therapeutische Anwendungen, etwa in der Zelltherapie oder bei Immunmodulation, wo hochreine Zellpopulationen benötigt werden.
Sang total et anticoagulation
Afin d'identifier des cellules ou des populations cellulaires spécifiques, telles que PBMC.Pour pouvoir isoler le sang directement à partir du sang total, il est essentiel de mélanger l'échantillon de sang avec des anticoagulants. Sans anticoagulants (en particulier les anticoagulants plasmatiques), le sang coagulerait et il ne serait pas possible de séparer proprement les composants cellulaires. En fonction de l'analyse, différents anticoagulants sont utilisés pour préserver la morphologie cellulaire, la coagulabilité ou la composition chimique du sang.
L'anticoagulation désigne l'inhibition de la coagulation sanguine par l'administration ou l'ajout de substances anticoagulantes. Dans le cadre de la collecte de sang total, cela signifie que le sang est stabilisé pendant ou immédiatement après la collecte en le mélangeant avec des anticoagulants. Cela empêche la coagulation et rend le sang stable pour la suite du traitement. Les principaux anticoagulants peuvent être divisés en trois groupes principaux :
1. les anticoagulants plasmatiques pour les prélèvements et les transfusions sanguines
2. inhibiteurs directs et indirects de la coagulation sanguine (anticoagulants systémiques)
3. les inhibiteurs de l'agrégation plaquettaire (anticoagulants indirects)
Systemische Antikoagulantien als auch Thrombozytenaggregationshemmer werden als Medikamente eingesetzt, wirken im Körper (in vivo), und sind für die Zellseparation nicht geeignet.
Anticoagulants pour le sang total et le plasma
Les anticoagulants plasmatiques sont principalement utilisés pour les prélèvements et la conservation du sang. Ils empêchent la coagulation du sang en dehors de l'organisme (in vitro) en liant ou en inactivant les facteurs de coagulation ou le calcium (essentiel à la coagulation du sang).
Die wichtigsten plasmatischen Antikoagulantien sind EDTA (Ethylen-Diamin-Tetraessigsäure) Citrat (z. B. Natriumcitrat) und Heparin.
EDTA Lösung, 0.2 M in PBS
Sterile Lösung (Chelatbildner) zur Verhinderung der Aggregation von Thrombozyten
Fazit
Blut ist ein unverzichtbares Forschungsmedium, da es zahlreiche zelluläre und lösliche Bestandteile enthält, die Einblicke in physiologische Prozesse, Krankheitsmechanismen und therapeutische Ansätze ermöglichen. Entscheidend für aussagekräftige Ergebnisse sind jedoch eine sorgfältige Probenvorbereitung und der Einsatz professioneller Produkte zur Zellanreicherung, um Blut optimal für Forschung und Diagnostik nutzbar zu machen.