PBMC - 外周血单核细胞
Eine periphere mononukleäre Blutzelle (Peripheral Blood Mononuclear Cell, PBMC) ist eine Blutzelle mit einem einzigen, runden Kern. Der Begriff „peripher“ bezeichnet ausgereifte Blutzellen, die sich nicht in blutbildenden Organen wie dem Knochenmark befinden, sondern im peripheren Blut zirkulieren.
NOTE: Unter peripherem Blut versteht man das Blut, das nach seiner Bildung im Knochenmark in die Blutgefäße gelangt und dort im Kreislauf zirkuliert.
Zu den Hauptbestandteilen des peripheren Blutes gehören neben dem Blutplasma, das als Transportmedium dient, auch rote Blutkörperchen (Erythrozyten), weiße Blutkörperchen (Leukozyten) ) 和 血小板(血栓滕)。
PBMC 有时也称为 PMNC（外周单核细胞）或 MNC（单核细胞），由所有单核白细胞组成。这些细胞包括
- 淋巴细胞（T 细胞、B 细胞、NK 细胞）
- 单核细胞
- 树突状细胞和
- 嗜碱性粒细胞
用密度梯度离心法分离/富集白细胞母细胞
PBMC（外周血单核细胞）一词与从以下细胞中分离细胞密切相关 全血 通过 密度梯度离心. Die Trennung der Blutbestandteile ist möglich, da sie verschiedene Dichten aufweisen; dies geschieht durch eine einstufige Zentrifugation in einem geeigneten Dichtegradientenmedium. Die Trenngrenze (Cut-Off) für die mononukleären Zellen liegt bei 1,077 g/ml.
Die dichtegradienten-angereicherten PBMC werden manchmal als Buffy Coat bezeichnet. In diesem Zusammenhang beschreibt Buffy Coat die Schicht der angereicherten Leukozyten in der Interphase. Für diesen speziellen Fall besteht der Buffy Coat nur aus mononukleären Zellen und ist in diesem Sinn ein spezieller Buffy Coat.
粒细胞等多形核白细胞（具有多个分节核）在此部分中被耗尽。中性粒细胞和嗜酸性粒细胞无法从标准密度梯度分离法制备的 PBMC 部分中富集（培养基密度为 1.077 g/ml）。嗜碱性粒细胞的密度不同，可在 PBMC 部分中发现部分嗜碱性粒细胞。与初始细胞数相比，红细胞明显减少。
首先，在血液或样本材料上覆盖一定密度的合成聚合物溶液。制备完成后，进行离心步骤。在两种溶液的中间相中，细胞以相应的密度聚集。含有 PBMC 的间相会被小心移除。然后对富集的单核细胞进行洗涤并用于进一步的应用。
Allgemeiner Ablauf einer PBMC Anreicherung mit Hilfe eines Dichtegradientenmediums
Zunächst wird eine synthetische Polymerlösung, mit einer definierten Dichte, mit Blut oder Probenmaterial überlagert. Nach der Vorbereitung erfolgt ein Zentrifugationsschritt. In der Interphase zwischen den beiden Lösungen reichern sich die Zellen mit der entsprechenden Dichte an. Die Interphase, die die PBMCs enthält, wird vorsichtig entfernt. Die angereicherten mononukleären Zellen werden anschließend gewaschen und für die weitere Anwendung verwendet.
用 PBMC 旋转培养基分离/富集 PBMC
这个 全血 小心翼翼地叠加到 PBMC 旋转培养基 (2) ，将其放入离心管中。必须注意确保两种液体不会混合。也可以使用 pluriMate 管。pluriMate 隔离层便于分层，防止样品材料与密度介质混合。
图 1： 制备 PBMC 时使用 PBMC 旋转培养基.将样品材料 (1) 小心地覆盖在密度介质 (2) 上。
在接下来的离心步骤中，实际的 密度梯度离心将样本分离到不同的层中。单核细胞（2）在血浆（1）和密度介质（3）之间富集。
