PBMC - 末梢血単核細胞
Eine periphere mononukleäre Blutzelle (Peripheral Blood Mononuclear Cell, PBMC) ist eine Blutzelle mit einem einzigen, runden Kern. Der Begriff „peripher“ bezeichnet ausgereifte Blutzellen, die sich nicht in blutbildenden Organen wie dem Knochenmark befinden, sondern im peripheren Blut zirkulieren.
NOTE: Unter peripherem Blut versteht man das Blut, das nach seiner Bildung im Knochenmark in die Blutgefäße gelangt und dort im Kreislauf zirkuliert.
Zu den Hauptbestandteilen des peripheren Blutes gehören neben dem Blutplasma, das als Transportmedium dient, auch rote Blutkörperchen (Erythrozyten), weiße Blutkörperchen (Leukozyten) )と血小板(血栓)。
PMNC（末梢単核球）またはMNC（単核球）と呼ばれることもあるPBMCは、すべての単核白血球で構成されています。これらには
- リンパ球（T細胞、B細胞、NK細胞）
- 単球
- 樹状細胞と
- 好塩基性顆粒球。
密度勾配遠心分離によるPBMCの単離／濃縮
PBMC(末梢血単核球)という用語は、以下の細胞からの分離と密接に関連しています。 全血 を通して 密度勾配遠心分離. Die Trennung der Blutbestandteile ist möglich, da sie verschiedene Dichten aufweisen; dies geschieht durch eine einstufige Zentrifugation in einem geeigneten Dichtegradientenmedium. Die Trenngrenze (Cut-Off) für die mononukleären Zellen liegt bei 1,077 g/ml.
Die dichtegradienten-angereicherten PBMC werden manchmal als Buffy Coat bezeichnet. In diesem Zusammenhang beschreibt Buffy Coat die Schicht der angereicherten Leukozyten in der Interphase. Für diesen speziellen Fall besteht der Buffy Coat nur aus mononukleären Zellen und ist in diesem Sinn ein spezieller Buffy Coat.
顆粒球のような多形核白血球（複数の分節した核を持つ）は、この画分では減少します。好中球および好酸球顆粒球は、標準的な密度勾配分離で調製したPBMC画分から濃縮することはできません（培地の密度は1.077g/ml）。好塩基性顆粒球は密度が異なり、PBMC分画に部分的に認められます。赤血球は最初の細胞数に比べて強く減少しています。
まず、決められた濃度の合成ポリマー溶液を血液またはサンプル物質と重ね合わせます。調製後、遠心分離を行います。2つの溶液の間の相に、細胞が対応する密度で蓄積します。PBMCを含む間相は注意深く除去されます。濃縮された単核球は洗浄され、さらなる用途に使用されます。
Allgemeiner Ablauf einer PBMC Anreicherung mit Hilfe eines Dichtegradientenmediums
Zunächst wird eine synthetische Polymerlösung, mit einer definierten Dichte, mit Blut oder Probenmaterial überlagert. Nach der Vorbereitung erfolgt ein Zentrifugationsschritt. In der Interphase zwischen den beiden Lösungen reichern sich die Zellen mit der entsprechenden Dichte an. Die Interphase, die die PBMCs enthält, wird vorsichtig entfernt. Die angereicherten mononukleären Zellen werden anschließend gewaschen und für die weitere Anwendung verwendet.
